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二硫键是许多蛋白质三维结构中的重要组成部分。二硫桥键可降低肽的弹性、增加刚度，并减少潜在构象的数量。这样的构象限制对生物活性和结构稳定性来说是至关重要的。它的替换对蛋白质的整体结构来说将可能是戏剧性的。二硫键的有效形成涉及多方面，包括对半胱氨酸残基的恰当保护、保护基团的脱除方法和配对方法等。